На бусы: Отзывы на бусы пластиковые белые 1.6 м

Содержание

«Нефть в обмен на бусы»: Доля энергетического экспорта России достигла максимума за 4 года | 06.06.18

Российская экономика продолжает погружаться в зависимость от экспорта простейшего минерального сырья, на доходы от которого покупаются технологии и потребительские товары.

Доля топливно-энергетических товаров в общей структуре экспорта, падавшая вместе с ценами на нефть, вернулась на уровни 2014 года, следует из опубликованной в среду статистики ФТС.

Из 140 млрд долларов, заработанных российской экономикой за январь-апрель, углеводороды принесли почти две трети (64,2%).

Керосина удалось продать на 18,1% больше, каменного угля — на 17% больше; экспорт газа увеличился на 5,3%, а нефти — остался практически неизменным.

На продукцию высоких переделов — машины и оборудование — пришлось лишь 5,6% экспорта; долю продовольствия в продажах на внешние рынки нарастить не удалось (5,3%), доля химической продукции упала с 6,6% до 6%.

Благодаря росту цен на нефть и привязанным к ним контрактным ценам на российский газ, страна получила на 26,8% больше валюты и нарастила закупки импортных технологий и потребительских товаров.

Общий импорт вырос на 18,6% — до 75 млрд долларов, из которых 46% было потрачено на машины и оборудование.

Ввоз электрического оборудования вырос на 28%, механического оборудования — на 17,3%, инструментов и оптических аппаратов — на 16,6%. Импорт легковых автомобилей подскочил почти в 1,5 раза.

Закупки продовольствия за рубежом выросли как в денежном выражении (на 10,3%), так и в физическом объеме (на 9,6%). Поставки подсолнечного масла увеличились в 2,3 раза, молока и сливок — на 19,6%, сыров и творога — на 9,7%, рыбы свежей и мороженной — на 7,8%. Импорт одежды и обуви подскочил на 16,8%.

«Мы создали идеальную модель обмена сырья на бусы», — отмечает заведующий отделом международных рынков капитала ИМЭМО РАН Яков Миркин: в результате экономика очень сильно зависит от внешних факторов — от спроса на сырье и, соответственно, от курса евро и доллара, от внешних инвесторов, от спекулянтов carry trade.

От импортного оборудования мы зависим на 70-90%, по ширпотребу и непродовольственным товаром — более чем на 50-60%», — перечисляет Миркин, приводя пример: в России в месяц производится порядка 300-350 металлорежущих станков в месяц, или лишь 6-7% от количества, которое выбывает в результате износа.

Чтобы выйти из порочного круга, нужна приватизация, демонополизация, создание рыночной среды, налоговые стимулы и снижение налогового бремени, считает Миркин, в противном случае «замороженная экономика» гарантирует стагнацию, темпы роста около нуля, критическую зависимость от импорта и кризисы раз в 15-20 лет.

Валентина БЕЛЯЕВА. Жемчуг на бусы

* * *

Боли раздолье:
не для ладоней донья мои.

Пальцы на лады складывала –
ой да неладно, ой да нестройно…
Ладно ли скроено –
неблагодарная –
даром дали. Добра-то…
Да не во благо, того добра, –
до своих бобрят все бобры.
Дала было волю
да ладоням недобрым
да по складам, да по кладам,
да по моим доньям…
Складень раскладывала –
обрыдала.

* * *
Это легко – на асфальт этажи пролететь
(кто на глагольную рифму здесь кинется
                                                 коброй?)…
Как я могла у Тебя попросить захотеть
Быть с человеком, которого Ты не одобрил?
Знаю, спасал, и спасаешь, и снова спасешь,
Трудно идти – каждый шаг помогаешь осилить.
Только понять бы – за что, почему –
                                                   не даешь,
Где в этом благо? И вот, удивительно синий
Вечер, и снег, фонари, и подъездная дверь,

Зимняя сказка, в которой героя не будет,
А героиня соседям все скажет про дрель,
Что по субботам с утра так настойчиво будит.
А героиня пойдет для церковной свечи
Вместо утерянного купит новый подсвечник.
И потекут, потекут к подбородку ручьи.
С пятой попытки – и снова навылет, кромешный.
Не показалось тогда, когда взял и не дал,
Все-таки дал, только так дал, что нЕ дал. Понять бы,
Только понять бы, что в этом была не беда,
Чтоб на двоих не одна – две веселые свадьбы.
Все не пойму, в чем он был, этот промысел Твой,
Чтобы – не дать – на двоих одного одеяла?
Плач, что с рыдания враз переходит на вой.
Господи, что же такого я – не – потеряла?
Детка, давай, успокойся, ровнее дыши,
Эти кафизмы* еще проговаривать надо.
Ты же хотела – возможность спасенья души.
Ты попросила. И ты получила. Не рада?

Куколка
Этот крест – над головой,

От креста – стальные нити.
Лишь качнет – пляши и пой.
Это все твои событья.
Плохо пляшешь и поешь –
Значит, раскачать сильнее.
Сил осталось лишь на дрожь,
И куда еще больнее.
Сталь, впиваясь, до нутра
Прорывает все покровы.
С вечера и до утра,
И весь день пляши покорно.
Чуть ослабли нити – вновь
Натянуть, до новых ссадин.
Такова – его – любовь:
Знать, что, отпустив, не сладит.
Было время – жил и жил,
Поживая, проживая.
Пляшет из последних жил,
Все как будто бы живая.
Сталь крепка, и ржа не ест.
Всей любви меж ними – крест.

***
А теперь тебя нет,
и на свете приюта мне нет!
Вероника Тушнова

А теперь тебя нет, то есть, где-то, наверное, есть,
Для кого-то, наверное, есть, тот, которого знала,
Тот, кому посвящала стихи, с кем пирожные есть

Я ходила в кафе; тот, кого провожала с вокзала.
Тот, с которым смотрела, не помню какое, кино,
Тот, с которым училась заваривать кофе «по-венски»
И которого очень любила. У моря есть дно.
Будет разным для нас навсегда берег невский,
Так же как и все то, что теперь окружает меня,
Мне с тобой не делить ничего из того, что возможно:
Дней, ночей, вечеров, утр. Живи, никого не кляня.
Я не знаю, как врозь, если вместе и не было тошно.
А теперь тебя нет. Только странный ночной сериал,
Что заботливо мозг мне включает, как только подушки
Головою коснусь. Не оставил и не потерял.
Ожидать новый приступ, надеяться, не до удушья.
Может, это был сон, только кадр из ночной череды,
Все придумано мной, от рябины до ряби на Волге,
И поземка, что сразу за мной заметала следы,
И учебник, оставшийся там, в магазине на полке.
Гладил волосы мне и молчал, приручалась с трудом,  
Все равно не кончается жизнь, и трава луговая,
И столбы телеграфные, хлеб, воскресение, дом…
Вероника Михайловна, как же я Вас понимаю!

* * *
ничего невозможно вернуть назад
не помню какого цвета твои глаза
не помню морщинок у краешков рта
а ты и не улыбался мне никогда

назад ничего невозможно вернуть
у тебя один путь у меня другой путь
все равно мне какого цвета глаза твои
если в них не осталось ко мне любви
О той любви, что через все края

Не трогай меня – не звони, не пиши,
не снись по ночам и в миру не встречайся,
хоть бей ты посуду и мебель круши,
хоть над табуретом безмолвно качайся.
Не трогай меня – не тревожь, не зови
и так оглушительно громко не думай
о том, что твоей не хватило любви,
о том, что сломался мой внутренний тумблер
(жаргонное – тумблер включать – в дурака
играть, притворяясь, что не понимаешь,
так, к слову пришлось, и сломалась строка,

строфа), и как тесно одной мне на кра-еш-
ке – крыши ли, жизни, за – край, через – край,
через – все – края – одновременно – хлынуть
умею, но так мне не хочется в рай,
где не успевают ни разу остынуть
горшки обожженные, как мне просить
Его, чтобы Он, наконец, согласился
и дал тебе сил отпустить и простить
(простить, отпустить – так точнее), и смыслом
наполнил твой мир, чтобы ты без «почти»
был счастлив, и так оглушительно громко
не думал о том, чтобы произойти
смогло невозможное, как эту ломку
по всем переломам, неважно, срослись
или не успели, – ломаешь – мне дальше
терпеть, но пойми, не сердись и не злись,
что спать не ложусь, чтоб услышать, пораньше.
Молить – прикоснись, пусть хотя бы во сне,
или попадись мне навстречу случайно,
оглохнуть от собственных слез по весне,
от мыслей твоих просыпаться ночами,
любовь – через все, что возможны, края,
с обеих сторон – до – не трогай меня…
           

У Достоевского об этом
куда понятней разговор
                                                         Ирине Карениной
Он приходит во снах, говорит, что построит домик,
что в саду будут яблони, груши, рябина, сливы… –
утром после него ты всегда открываешь томик
и читаешь псалмы, чтоб остаться разумно счастливой.

Он приходит во снах, говорит, что давно в процессе
иск, и все таки начат процесс развода,
значит, утром опять упражнения на мышцы пресса,
но сначала с усердьем налечь на святую воду.

Он приходит во снах, говорит, что устал смертельно,
от того, что не веришь и что звонил напрасно.
Первым делом проверить, на месте ли крест нательный,
перед тем, как заснуть, и, как только проснешься, сразу.

Он приходит во снах, говорят, принимайте ванны,
соблюдайте диету, гуляйте, поменьше стрессов…
Если ты понимаешь, настолько все это странно,
значит, ты понимаешь, как это все страшно – бесы.

* * *
Слезы, что застилают дали,
не навек – как-то скажешь: были…
День, в который тебя предали,
дню, в который тебя забыли,
рознь. Не думай о том, что станет
с теми, кто о свое колено
преломил твой хребет. Растает
лед весною? Да непременно!
Переломан, не станет прежним –
Переломы и вдоль, и между.
Перетерпишь. И переступишь.
Пережить, потому что любишь.
Больше жизни – едва ли, точно
больше смерти. И пусть заочно
каждый день говоришь, что любишь.
Перетерпишь. И переступишь.
Каплют. Катятся. Не остаться
им в глазах. Как тебе расстаться
с дорогим и живым, который
для тебя уже мертв. Контора
пишет, спишет, спеши, все будет.
Коль не вылечит, так рассудит.
Даже слез не вернешь обратно,

что уж там о. .. И так понятно.
Три строфы про птицу,
вату и молоток
 
Больше не снится. Что ж, улеглось, и вполне.
Странная птица с короной на голове.
Радужно-желтый, хрупкий стеклянный предмет.
Жуткие годы, яркий хронический бред.
Свадебный лебедь. Тонкий и желтый намек.
Рыжая ведьма. В сердце твоем уголек.
В руки подарок. Слезы остались в глазах.
Жизнь без помарок, коль на одних тормозах.

Только не злиться. И не пенять на судьбу.
Желтая птица в синем картонном гробу.
Нет, не забылось. И не ходи ворожить.
Чтоб не разбилась, ватою переложить.
Три переезда. Сколько в пожарах, сочти.
И бесполезно им параллелить пути.
Сказка. Чем дальше, тем интересней сюжет.
Правда ли, фальшь ли – нет ее рядом, и нет.

Пьяный проспится, ну а дурак никогда.
Желтая птица брызнула словно вода.
Сломана шея. Ох ты и остр, излом!
Раны-траншеи. Где вы, пустырник и бром?
Плакать довольно над на полу молоком.
Это не больно – бить по стеклу молотком.
Можно иначе, только постись и молись.
Кто-то не плачет. Слезы поизвелись.  
           

* * *
У меня по этому поводу инвентарный,
Если так говорят о душе, учет,
У меня по этому поводу вянет карма,
Сломался внутренний таймер, и тушь течет.
У меня по этому поводу рвутся бусы,
И разбегаются бусины – нет резвей,
У меня по этому поводу безыскусен
Единственный тост нерадостный – «Не трезвей!».
У меня по этому поводу все в подушку
Да в платок, расписной и павловский, в огурцах,
У меня по этому поводу шарф надушен,
Так, что душно, не от души – в сердцах.
У меня по этому поводу стынет борщик,
Слезы стынут, и стонут струны, и стал простым
У меня по этому поводу разговорчик –
С глаз долой, вон из сердца, и след простыл.

***
                          Дине Семеновне Гордон
Моя – на несколько минут,
Потом на месяцы – чужая.
Я и не знала, провожая,
Как немощен без искры трут,
Как недостаточно – колец,
Чтоб стать мудрей и прозорливей. ..
Бродя по краешку залива,
Считая по ночам овец,
Воюя с молью и бельем,
Картофель в блюде разминая,
Вас вспоминаю, вспоминаю…
Быль, не поросшая быльем:
Классический еврейский нос,
Седые вьющиеся пряди,
Страсть хороша в любом наряде,
«Задайте мне другой вопрос!»,
О тучных клетках разговор,
Беседы о потомках Евы…
Признаюсь честно: непременно
Я б Вас украла, будь я вор.

* * *
Боялась, как ты мне ответишь на мой
вопрос, неудобный и слишком прямой,
но так хорошо время сводит на нет
потребность мою получить твой ответ.
Не так улыбнуться – боялась, не те
надеть к платью бусы – боялась, затей
боялась, тебе позвонить лишний раз –
боялась, и так проживала, боясь,
свои дни и ночи – не в силах понять,
что, раз не твое, то нельзя потерять.
Ни раз не мое, и не два, и не три,
и если тому, что творится внутри,
нет выхода – действием на результат,
то кто тебе доктор захлопнуть гештальт?
Не твой – с чем сравнить?
                                  Вот, допустим, гроза,
есть гром по ушам, копья молний в глаза,
есть дождь, промочивший тебя до белья –
но ты про грозу и не скажешь – «моя».
И как ее можно присвоить, скажи,
грозу, без обмана, без толики лжи,
как можно – присвоить грозу… По судьбе
ни разу меня не досталось тебе.
Боялась признаний, боялась потерь,
боялась быть лишней – тогда, а теперь,
когда все равно, что там ты и как ты,
боязней моих выстывают следы.

* * *
От тебя осталась только боль,
только рана, от которой шрам
на всю жизнь, что будет не с тобой.
Не с тобой войду под руку в храм.

Хорошо ли, плохо ли – не мне
рассуждать, не здесь и не сейчас.
То не мой веночек на волне,
мой на дне. Потом рассудит нас

кто-то, где-то, как-то, но пока
высвободил из обеих рук.
Улетает шарик в облака,
гелиевый – как остаться вдруг?

Высвободил – дал свободу, но
что с ней делать, как же с нею быть?
Знаю слишком точно и давно,
почему нельзя тебя любить.

* * *
Для каждого порока есть порог,
Где разбивают головы в молитвах.
Для каждого порока есть пророк,
Что невзначай на улице окликнет.

Услышать бы, и мимо не пройти,
Остановиться, встретиться глазами…
И лишь потом искать себя в пути.
И лишь потом рыдать под образами.

Мне юноша вчера в глаза смотрел
И разговором скрашивал дорогу.
Пылало все внутри и лоб горел.
От жара, тем не менее, продрогла.

И дома не могла себя согреть.
Не помогали чай и одеяло.
Внутри же продолжало все гореть,
Да так, как будто что-то выгорало.

И, видимо, сгорело. Дрожь прошла,
но хлынули соленых два потока.
Когда же я наутро в храм пошла,
То поняла, что встречный был пророком.

Валентина БЕЛЯЕВА

Опасные жабы угрожают Австралии. Их яйца похожи на бусы

В Австралии люди начали находить возле своих домов ленты из шариков, похожие на бусы, но примерять их запрещает инстинкт самосохранения. Правильно — стоит только увидеть мамочку, которая их разбрасывает.

Сильные дожди и потопы — это ещё не все беды австралийцев. Жители штата Квинсленд начали находить на улицах, в парках и даже на порогах своих домов нечто, одновременно напоминающее бусы и стеклянную лапшу, пишет Yahoo! News.

Жабы откладывают икру, похожую на бусы

Нетрудно догадаться, что подобные находки в Австралии просто не могут не быть живыми. Биологи объяснили: это яйца жабы-аги, или тростниковой жабы.

На материке она — иностранка. Этих жаб завезли в начале XX века из Южной Америки для борьбы с насекомыми. Но земноводным так понравилось на новом месте, что они решили обосноваться по-серьёзному.

Ситуация в Австралии оказалась идеальной для распространения жаб

Жабы-аги начали быстро размножаться, и интродуцированный (чужеродный) вид стал большой проблемой для экосистемы Квинсленда. Земноводные опасны для местной дикой природы, так как у них есть железы, которые вырабатывают яд.

Яйца аг способны выдерживать любые экстремальные условия. Головастики из них вылупляются тоже с непозволительной скоростью — уже через пару дней после того, как мама откладывает икру.

Среда распространения жаб-аг по Австралии

Наводнения в Австралии помогают этим «бусам» с икрой распространяться по северо-востоку континента, что делает ситуацию ещё более сложной. Одним словом, эти жабы — настоящая казнь египетская.

Жабы-агы — головная боль биологов Австралии

Это ещё не все проблемы. Профессор Рик Шайн из Университета Маккуори предупреждает, что вскоре и взрослые жабы станут серьёзной проблемой. Всё дело в том, что они открыли для себя… автостоп.

Так как из-за стихийного бедствия многие жители вынуждены спешно покидать свои дома, вместе с вещами они захватывают и аг-путешественниц. Одним словом, для австралийцев — беда, для аг — подарок судьбы.

Поэтому власти и биологи призывают людей любыми способами избавляться от бус с икринками. Иначе наступление аг будет не остановить.

Фотограф из ЮАР решил внимательнее разглядеть необычную ветку, но в этот же момент она сама решила получше приглядеться к нему. Такие гляделки закончились необычной для обоих фотосессией.

А всё в той же Австралии пляжи покрыли необычные валуны. На них лучше не только не наступать, но и не смотреть.

Меняем бусы на деньги. — отзыв о Hailing Pearl Farm, Уезд Линшоу, Китай

Здесь всё поставлено, как в старые добрые колониальные времена. И в качестве рекламного слогана или, если хотите, эпиграфа, можно поставить такую фразу:
— Меняем бусы на деньги.
Причём в роли папуасов выступаем мы, туристы.
Местное население живо смекнуло, что если в заливе, в сравнительно благоприятных условиях насажать в садок устриц, и каждой подложить по песчинке, а то и по две, то через некоторое время получим по конкретной жемчужине. И нырять за ней никуда не нужно будет. Просто вытащил сетку и сгрёб драгоценности лохматой лапой. Аквакультура, однако.
Плантации по разведению жемчуга отлично видно с высоты. Нет, на самолёт или вертолёт тратиться не нужно. Достаточно купить билет на канатную дорогу, что ведёт на остров обезьян. И всё. Сиди. Смотри. Наслаждайся. Пока едешь, замечательный вил открывается на морской залив, где каждый клочок земли, вернее воды, занят под жемчужные фермы. Прикольно. И даже слегка интересно.
Если потом, уже вернувшись с острова, побродить по городу, что расположен у начала канатной дороги, то почти в каждом магазине или лавочке можно будет этим жемчугом затариться. То есть поменять в лучших аборигенских традициях, свои кровные доллары, рубли, евро и юани на нитки жемчуга. На бусы, короче.
Нет, если кому нужно, то добро пожаловать. Бусы, браслеты, это ж вещь ценная! Особенно для женщин. Особенно на подарки.
Кстати, о подарках. Нитка жемчуга, привезённая с Хайняня, заставит Ваших друзей, знакомых, родных просто визжать от восторга. А учитывая сравнительно небольшую цену, то Вы и сами будете счастливы.
Понятно, что изделия из жемчуга крупного и ровного стоят, как космический корабль. Но всё равно, дешевле, чем скажем на Майорке. Зато обычную, типовую нитку можно сторговать от 10 до 20 долларов. В зависимости от размера, длины, цвета и ровности перламутра.
И ещё один совет. Не спешите брать тут же, не отходя от кассы. В той же Санье и прилегающих к ней бухтах прямо по пляжу ходят продавцы с лотками и корзинками, у которых можно сторговать нужный Вам товар слегка дешевле. Всё зависит от вашего умения очаровать продавца ненужных стекляшек, дорогие папуасы…

Меняйло сравнил отмену санкций за возврат Крыма с обменом золота на бусы: Политика: Россия: Lenta.ru

Губернатор города федерального значения Севастополя Сергей Меняйло назвал принятую в четверг, 4 февраля, резолюцию Европарламента по Крыму давлением, манипуляциями и личным оскорблением всех россиян, сообщает ТАСС.

«Они собрались бусы на золото у дикарей менять? Обратились явно не по адресу!» — привел слова Меняйло официальный представитель севастопольского правительства Кирилл Москаленко.

В четверг депутаты Европарламента на пленарной сессии в Страсбурге проголосовали за резолюции по Крыму, передает ТАСС. Они отметили, что Евросоюз до сих пор считает воссоединение полуострова с Россией незаконным. Вместе с тем они заявили, что отмена антироссийских санкций невозможна без возврата Крыма Украине.

«Восстановление контроля Украины над полуостровом является одним из условий, необходимых для возобновления отношений сотрудничества с Российской Федерацией, в том числе приостановления соответствующих санкций», — отмечается в резолюции.

Материалы по теме:

26 января глава МИД России Сергей Лавров заявил, что Москва ни с кем не ведет переговоров о возвращении Крыма в состав Украины. «Нам нечего возвращать. (…) Крым является территорией РФ в полном соответствии с волеизъявлением народов [полуострова]», — отметил министр. Он также посоветовал не руководствоваться высказываниями «чужого дяди» о полуострове, а съездить туда, как уже сделали многие журналисты и ряд европейских политиков, потому как «лучше увидеть своими глазами».

25 января в Крым впервые после воссоединения региона с Россией прибыла официальная делегация Совета Европы. Миссия отправилась с задачей проинспектировать, как на полуострове соблюдаются права человека.

В марте 2014 года Крым вошел в состав Российской Федерации по результатам референдума, в ходе которого подавляющее большинство населения полуострова, участвовавшего в голосовании, выступило за воссоединение с Россией. Киев, а также ряд западных стран отказываются признать результаты плебисцита. В Москве, в свою очередь, говорят, что процедура присоединения региона соответствовала нормам международного права.

За счет каких проектов Россия и Китай смогут удвоить товарооборот

Товарооборот между Россией и Китаем за первые девять месяцев текущего года вырос до $102,5 млрд, поднявшись по сравнению с показателями 2020-го почти на 29,8%. При этом в торговом паритете импорт из РФ превысил китайский экспорт на $7,7 млрд — $55,1 млрд против $47,1 млрд. С января 2021 года оба показателя показали значительный рост – 27,6% и 32,4% соответственно.

Сырьевая корзина

Объемы товарооборота по итогам девяти месяцев уже практически достигли значений за весь прошлый год ($107,76 млрд). Однако этот фактор объясняется в большей степени восстановлением торговых взаимоотношений между двумя странами после просадки в разгар коронавирусной пандемии. Более того, характер экспортных поставок из России в Китай за это время не претерпел серьезных изменений, и в настоящее время по-прежнему носит сырьевую направленность, сошлись во мнении опрошенные «Газетой.Ru» эксперты.

Так, по словам старшего научного сотрудника Центра международных финансов НИФИ при Минфине РФ Сергея Савинского, на углеводородное сырье приходится более половины (50-60%) от общего объема экспортных поставок продукции из Москвы в Пекин. В это число входит нефть, газ, уголь. Россия также продает в Китай лесозаготовки и рыбные товары. В свою очередь, поставки из Китая представляют более технологическую продукцию.

«Из Китая в Россию идет значительная доля машинно-технической продукции, электронные приборы, промышленные станки, механические устройства, предназначенные для использования в сельском хозяйстве. Иными словами, Пекин поставляет в Москву по большей части несырьевую продукцию», — подчеркнул эксперт.

Сырьевую зависимость России от экспорта в Китай также выделил и доктор экономических наук Никита Кричевский. По его мнению, торговые отношения Москвы и Пекина в настоящее время приносят по большому счету одностороннюю выгоду для Китая по причине неспособности России резко диверсифицировать экспортную корзину. В итоге сейчас Москва вынуждена закупать у Пекина даже агропродукцию, несмотря на имеющиеся в стране сельхозресурсы. Например, 80% чеснока сейчас завозится именно из Китая.

«Отношения России и Китая напоминают пресловутую максиму «нефть в обмен на бусы». При этом Москва ощутимо теряет в выручке за счет продажи необработанных сырьевых товаров (нефтепродукты и газ), а обратно получает продукцию с высокой добавленной стоимостью. Это удобно. Однако, по сути, Россия, сама того не желая, поднимает экономическую мощь Китая»,

— резюмировал экономист.

«Сила Сибири» и «Ямал СПГ»

Одним из самых крупных инвестиционных сырьевых проектов в торговом обороте России и Китая является газопровод «Сила Сибири», по которому в настоящее время прокачивается большие объемы природного топлива для внутреннего потребления Пекина. Долгосрочный контракт между двумя странами действует с мая 2014 года. Это соглашение стало одним из последних крупных газовых сделок, имеющих строгую привязку к нефтяным котировкам. Несмотря на относительно низкую стоимость тысячи кубометров газа (всего $171 по состоянию на конец сентября), «Газпром» все равно извлекает солидную выгоду за счет сокращения выплаты НДПИ, считают эксперты.

«Газпром» не бескорыстно привязывает газовую цену к нефтяной корзине, по которой считается НДПИ. Поэтому компании, как ни странно, выгодно продавать газ в Китай по $171 за тысячу кубометров. Иными словами, это позволяет монополисту оптимизировать размер налоговых выплат. Это устаревшая формула, однако «Газпром» продолжает пользоваться ей на протяжении последних 20 лет», — подчеркнул Никита Кричевский.

В результате получается солидная экономия на фоне значительных объемов газовых поставок в Китай. Каждый проданный по этой схеме кубометр наносит косвенный ущерб госказне, считает аналитик.

Выгоду «Газпрома» от нефтяной привязки долгосрочного топливного контракта с Китаем подчеркнул и директор Института национальной энергетики Сергей Правосудов. Дело в том, что большая часть направляемого газа по трубопроводу «Сила Сибири» идет с месторождения в Восточной Сибири, а относительно небольшие логистические расстояния позволяют «Газпрому» экономить на транспортировке топлива.

«Нефтяная привязка подразумевает ценовой лаг в 6-9 месяцев. С учетом взлета нефтяных котировок до $84 за баррель «Газпром» сможет увеличить контрактную стоимость газа в первом квартале 2022 года. Но даже нынешняя цена из-за нефтяного спада в прошлом году позволяет монополисту получать миллионы долларов»,

— объяснил эксперт.

В то же время в среднесрочной перспективе поставки газа по трубопроводу «Сила Сибири» будут расти. Так, к 2025 году топливный транзит в Пекин должен достигнуть отметки 38 млрд кубометров. Более того, в настоящее время на Дальнем Востоке открылся Амурский газоперерабатывающий завод, который направит в Китай дополнительные объемы продукции. Россия также может нарастить поставки в Пекин полиэтилена и полипропилена за счет строящегося нефтехимического предприятия компании «Сибур». В совокупности же рост экспортной продукции обеспечит повышение всего сырьевого товарооборота двух стран, заключил Правосудов.

При этом газовая прибыль России в торговле с Китаем не ограничивается прокачкой традиционного природного топлива. С освоением Северного морского пути (СМП) активное развитие получили продажи сжиженного газа через проект «Ямал СПГ». Так, Пекин сейчас закупает оттуда большие партии.

Миллиарды «Росатома»

Еще одним перспективным направлением развития торговых отношений России и Китая является инвестиционное сотрудничество в сфере атомной энергетики. Так, корпорация «Росатом» в настоящее время строит в азиатской стране блоки Тяньваньской АЭС. Возведение энергостанции началось еще в 90-е годы прошлого века, когда Россия построила два блока. В итоге к настоящему времени на АЭС работают уже 4 блока с российскими реакторами. Этот проект — один из самых важных атомных проектов в Китае, считают эксперты.

«Сейчас «Росатом» реализует строительство 7 и 8 блоков. Однако у корпорации есть и еще один проект на строительство двух блоков на АЭС Сюйдапу. В итоге сейчас в Китае работают 4 блока на российских реакторах, еще 4 находятся на стадии доработки», — подчеркнул специалист по атомной энергетике Александр Уваров.

«Росатом» отдает Пекину сами реакторы и техническое оборудование. Китай же отвечает за строительную часть работ по возведению блоков и установку турбин. В совокупности эти проекты могут принести «Росатому» более $10 млрд. Однако, что самое важное, Китай расплачивается за возведение блоков «живыми» деньгами, то есть строительство ведется на контрактной основе.

«Китайцы незамедлительно оплачивают все работы «Росатома» и его подразделений. Кредиты они не берут, что сохраняет в том числе средства Фонда национального благосостояния. Речь идет об $1,7 млрд за возведение пары блоков АЭС, совокупная же выручка от двух проектов составит свыше $3 млрд. Столь «жирные» контракты также могут принести компании еще $4,5-5 млрд за поставки топлива и помощь в обслуживании»,

— объяснил Уваров.

Кроме того, в настоящее время «Росатом» подписал контракт на строительство первого в Китае реактора на быстрых нейтронах CCR (типа БН). В этом случае корпорация заработает как минимум $1 млрд. Свою роль в увеличении прибыли может сыграть и пекинская программа энергоперехода, которая подразумевает увеличение атомных мощностей в стране до 100 ГВт. Пекин хочет довести свой энергопарк до показателей генерации 100 ГВт. В случае успешного запуска инновационного проекта реактора БРЕСТ-ОД-300 «Росатом» ощутимо нарастит экспортную выручку еще на десятки миллиардов долларов, заключил специалист.

Туристический локомотив

Значительный потенциал развития двухсторонних отношений Россия и Китая кроется не только в сырьевых и энергетических секторах. Россия может извлечь больше выгоды из развития внутреннего туризма за счет привлечения граждан из КНР, активно интересующихся дальневосточным направлением. Так, за прошлый год китайские туристы оставили за границей значительные денежные суммы, часть из которых с окончанием коронавирусной пандемии могла бы заработать и Россия.

«Сейчас Китай располагает населением со средним достатком, быстрыми темпами растет число предпринимателей. Все это приводит к росту числа дальних путешествий. В доковидное время Китай оставлял за границей $200 млрд и выше. В туристической отрасли перед Россией открываются действительно большие горизонты»,

— подчеркнул Сергей Савинский.

Он также добавил, что активное привлечение китайских деловых партнеров способствовало бы развитию малых и средних бизнес-предприятий РФ, основу которых составляют гостиницы, рестораны и туристические агентства. Распространение же программы туристического кешбэка на иностранных граждан, включая жителей Китая, стало бы предпосылкой для увеличения общего турпотока в России.

«Туристический сектор в перспективе должен стать локомотивом увеличения товарооборота России с Китаем. Азиатские туристы с удовольствием ездят не только в Москву и Санкт-Петербург, но и посещают другие регионы. Азия же с учетом городских конгломераций остро нуждается в природе, поэтому РФ может стать для китайских граждан спасением от тотальной урбанизации», — объяснил Савинский.

Бусы из ярких разноцветных бусин из полимерной глины, мастер

В процессе лепки всегда остается пластика, непригодная для дальнейшей «чистовой» лепки, как правило — это окончания тростей с деформированным рисунком, неровные срезы, обрезки и т.д. Многие из этих «остатков» имеют красивые и яркие оттенки, которые можно рассортировать по цвету, перемешать и получить новый оттенок, а если цвет смешанной глины получился непригодным для основной лепки, то такой пластик можно использовать в качестве основы для бусин. В данном уроке хочу предложить вам новый способ утилизации таких остатков, но не прятать эту глину внутрь бусин или использовать её в качестве подложки, а создать из неё полноценное изделие.

1. Из инструментов нам нужно немного: лезвие, иголка, возможно скалка и обязательно каттер круглой формы очень маленького диаметра, примерно в 5-7 мм. Если такого каттера нет – используйте любой подручный предмет, например металлический колпачок, наверняка в вашей фурнитуре таковой найдется.

2. Возьмите всю пластику, которая непригодна на ваш взгляд для лепки и рассортируйте её по цвету или по рисунку, если это остатки пластов.

3. Разогрейте пластику одного оттенка в руках, не перемешивая её, а просто сжимая, после сформируйте трость и посмотрите, какой рисунок у вас получится на поверхности трости. У меня — это были остатки от мокуме гане, поэтому трость получилась с интересными переходами и узорами, я решила больше её не трансформировать, а раскатать до диаметра в 1 см и нарезать на толстые срезы, примерно 5-7 мм толщиной.

4. Каждый из срезов необходимо прикатать и округлить края пальцами, чтобы по форме получились кружки с обтекаемыми краями. Каждый кружок нужно положить на ровную поверхность и придавить сверху по центру фигуры пальцем, чтобы он выровнялся и стал плоским.

5. Теперь возьмите каттер круглой формы и вырежете серединку в каждом кружочке. Не переживайте, если бублики будут отличаться друг от друга размерами – в готовое изделие это добавит неординарности и оригинальности.

6. Второй способ подойдет для тех тростей, которые при разогреве пластики и формировании из неё трости имеют не такой яркий и интересный узор на своей поверхности. Снова выберете остатки пластика, сочетающегося по цвету, и сформируйте из них трость.

7. Полученную трость закрутите жгутом, при этом на нем появляться четкие полосочки разного цвета. диаметр трости должен быть в пределах 1,0-1,2 см.

8. Раскатайте трость, чтобы её поверхность стала ровной, и нарежьте на срезы толщиной в 5-6 мм.

9. Округлите острые части срезов пальцами и каттером вырежете по центру кружкой отверстия.


10. Аналогичным образом утилизируйте остатки пластики других оттенков. Примерная толщина готовых бубликов должна быть 3-5 мм.


11. Для бус, длиной в 40 см необходимо не менее 80 таких бубликов. Когда нужное количество бусин будет готово – поставьте их в духовой шкаф на обжиг.


12. Для сборки изделия нам понадобится совсем немного материалов: толстый шнур, быстросохнущий клей, два металлических пина, круглогубцы, два колпачка, замок и удлинитель. Нанизываете все бублики на толстый шнур и завязываете на несколько узелков его окончания. В узелки продеваете стержень металлического гвоздика и круглогубцами закручиваете его один конец вокруг узлов.

13. Пропитываете быстросохнущим клеем узелки, чтобы в процессе носки они не развязались и надеваете на стержень пина металлический колпачок. С обратной стороны колпачка из стержня делаете петельки и крепите в одной петельке замок, а в другой – удлинитель, собранный из соединительных колечек.

Бусы из бубликов собраны! Украшение получилось яркое и интересное, и как нельзя, кстати, подойдет для весенне-летнего периода времени!

Автор: Rusalina

транспозом, связанных с шариками, обеспечивают рабочий процесс без нормализации для подготовки библиотеки NGS | BMC Genomics

Образцы

Образцы геномной ДНК были получены из следующих источников: Человек (Институт медицинских исследований Кориелла, кат. с набором MasterPure-Blood от Epicenter [компании Illumina]), Mouse (Promega, кат. № G309A), Arabidopsis (BioChain Institute, кат. №D1634310–5), люцерна ( Medicago sativa , полученная от Mountain Rose Herbs, каталожный номер ALF-P10Z; ДНК экстрагирована с помощью набора MasterPure от Epicentre), E. coli (ATCC, кат. № 700926D-5) , B. cereus (ATCC, кат. № 10987) и R. sphaeroides (ATCC, кат. № 17023 [штамм ATH 2.4.1]), обработанные формалином количественные мультиплексные эталонные стандарты (Horizon, кат.№ HD798, HD799, HD803, HD729 Уровень 5 [совпадающий контроль]), образцы доноров FFPE (ProteoGenex, кат.№№ 081454 T2(1), 017102 T2(3), 018217 T2(2) и 033014 T2(3)). Образцы крови и слюны человека были взяты у здоровых добровольцев в возрасте > 18 лет, которые предоставили письменное согласие на использование своих образцов для исследования в соответствии с утвержденным протоколом Институционального контрольного совета (IRB); добровольцы были набраны из Illumina, Inc. с помощью утвержденных IRB плакатов с описанием исследования, которые были размещены на внутренних досках объявлений.

Стандартный протокол подготовки библиотек Nextera DNA flex

Если не указано иное, все библиотеки готовили с использованием следующего стандартного протокола, как описано в инструкциях производителя (Illumina, Nextera DNA Flex Library Prep Reference Guide).Все реагенты, перечисленные ниже, включены в набор Nextera DNA Flex (Illumina, каталожные номера 20 018 704, 20 018 705). Обзор рабочего процесса показан на рис. 7. Для каждого образца от 2 до 30 мкл ДНК (1–500 нг) загружали в одну лунку 96-луночного ПЦР-планшета с добавлением воды, не содержащей нуклеаз, для внесения общий объем до 30 мкл. Затем добавляли 20 мкл хорошо перемешанного мастер-микса для мечения (смесь транспозомы, связанной с шариками, и буфера для мечения, 1:1), чтобы довести конечный объем до 50 мкл.После загрузки всех образцов планшет запечатывали и инкубировали при 55 °C в течение 15 мин.

Рис. 7

Обзор рабочего процесса Nextera DNA Flex Library Prep. * Расчетное время основано на подготовке 16 образцов с помощью многоканальной пипетки. BLB, буфер для лизиса крови. BLT, транспозома, связанная с бусами. EPM, улучшенная смесь для ПЦР. этанол, этанол. PK1, протеиназа К. RSB, буфер для ресуспендирования. SPB, гранулы для очистки образцов. TB1, буфер тегирования 1. TSB, буфер остановки тегирования. TWB, буфер для промывки тегов

После завершения реакции мечения выполняли очистку после мечения путем добавления 10 мкл буфера остановки тегов к каждой реакции и ресуспендирования гранул.Планшет запечатывали, инкубировали при 37 °C в течение 15 мин в термоциклере, а затем помещали на магнит 96-луночного планшета (Thermo Fisher Scientific, кат. № AM10027) на 3 мин (или до тех пор, пока раствор не станет прозрачным). . Супернатант отбрасывали. Затем были проведены два раунда промывок, каждый из которых включал следующие этапы: планшет снимали с магнита, добавляли 100 мкл промывочного буфера Tagment, планшет помещали обратно на магнит планшета на 3 мин (или до тех пор, пока ), а супернатант отбрасывают. Затем промытые шарики ресуспендировали в 100 мкл промывочного буфера Tagment перед тем, как планшет поместили на магнит еще на 3 минуты (или до прозрачности).

Третьей частью протокола была амплификация меченой ДНК с использованием реакции ПЦР с ограниченным циклом. Для каждой реакции готовили 40 мкл мастер-микса для ПЦР путем смешивания 20 мкл улучшенной смеси для ПЦР с 20 мкл воды, не содержащей нуклеаз. Промывочный буфер Tagment был полностью удален из каждой лунки для образца перед снятием планшета с магнита.Затем к каждому образцу добавляли 40 мкл мастер-микса ПЦР, добавляли 10 мкл адаптеров индексов в соответствии с используемой конфигурацией набора индексов (для плекса 24 [один индекс] или плекса 96 [двойной индекс] добавляли 10 мкл смеси праймеров). для плекса 24 с двойным индексом использовали адаптер i5 на 5 мкл и адаптер i7 на 5 мкл), и образец перемешивали путем пипетирования 10 раз. Планшет запечатывали и помещали в термоциклер с нагретой крышкой и проводили со следующими параметрами ПЦР: 68°С в течение 3 мин, 98°С в течение 3 мин, затем 5 циклов по 45 с при 98°С, 30 с. при 62 °C и 2 минуты при 68 °C, перед последней минутой при 68 °C; использовали пять циклов ПЦР, если не указано иное.Затем планшет центрифугировали в течение 1 мин при 280 x g.

Следующим этапом подготовки библиотеки ДНК была очистка амплифицированных библиотек, которую проводили с использованием процедуры двусторонней очистки гранул с использованием гранул SPRI (называемых гранулами для очистки образцов, SPB). Обратите внимание, что SPB — это другие бусины, отличные от тех, которые использовались на этапе маркировки выше. Планшет для ПЦР помещали на магнит для планшета на 5 мин. Затем 45 мкл прозрачного супернатанта переносили на свежий миди-планшет.Для каждого образца готовили разбавленный раствор СПБ путем смешивания 45 мкл СПБ с 40 мкл воды, не содержащей нуклеаз. Все 85 мкл раствора добавляли в каждую лунку для образца свежего миди-планшета, содержащую 45 мкл супернатанта, и образец перемешивали пипетированием 10 раз. Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 5 мин, затем помещали на магнит для планшета еще на 5 мин (или до тех пор, пока он не станет прозрачным). Во время инкубации в каждую лунку второго свежего миди-планшета добавляли 15 мкл неразбавленных SPB.Для каждого образца 125 мкл супернатанта из первого миди-планшета переносили на второй миди-планшет, содержащий 15 мкл неразбавленных SPB, и образец перемешивали пипетированием 10 раз. Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 5 мин, затем помещали на пластинчатый магнит на 5 мин. Супернатант удаляли, а в планшет на магните добавляли 200 мкл 80% этанола с последующей инкубацией в течение 30 с. Этанол удаляли, и гранулы снова промывали 80% этанолом, прежде чем дать им высохнуть на пластинчатом магните в течение 5 мин, чтобы обеспечить полное удаление этанола.Планшет снимали с магнита и к гранулам добавляли 32 мкл ресуспендирующего буфера. Гранулы ресуспендировали и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 мин. Затем миди-планшет помещали на магнит планшета на 2 минуты, после чего 30 мкл супернатанта, содержащего библиотеку ДНК, переносили на свежий 96-луночный планшет.

Последний шаг требовал объединения библиотек ДНК. При вводе ДНК от 100 до 500 нг библиотеки объединяли по объему (5 мкл на образец; до 96 образцов) в 1.Пробирка объемом 5 мл перед секвенированием. Единую объединенную библиотеку количественно определяли с использованием Qubit или PicoGreen и разбавляли до 2–4 нМ буфером для ресуспендирования; требуемая молярность зависит от секвенатора. Для входных ДНК менее 100 нг каждую библиотеку определяли количественно, а затем разбавляли до требуемой молярности буфером для ресуспендирования и 10 мкл каждого разведенного образца смешивали в одной пробирке. Затем объединенные библиотеки запускали на секвенаторе Illumina (т.е. MiniSeq, MiSeq, NextSeq 550, HiSeq2500, HiSeqX или NovaSeq).

В тех случаях, когда это описано, качество библиотеки определяли путем обработки 1 мкл объединенной библиотеки или отдельной библиотеки на биоанализаторе (Agilent 2100 Bioanalyzer) с использованием набора ДНК высокой чувствительности (Agilent, № по каталогу 5067–4626) или на фрагменте Анализатор (Advanced Analytical Fragment Analyzer) с комплектом для высокочувствительного анализа фрагментов NGS (Advanced Analytical, каталожный номер DNF-474).

Интегрированный протокол экстракции крови и слюны

Был разработан интегрированный протокол экстракции крови или слюны, предназначенный для использования с набором для подготовки библиотеки DNA Flex.Для подготовки и лизиса образцов крови свежую цельную кровь обрабатывали с использованием набора реагентов для лизиса Flex (Illumina, кат. № 20015884). Свежую цельную кровь собирали в пробирки для сбора с ЭДТА и хранили при 4 °C перед обработкой. Мастер-микс для лизиса готовили путем смешивания следующих объемов для каждого образца: 7 мкл буфера для лизиса крови, 2 мкл протеиназы К и 31 мкл воды без нуклеазы. Для каждого образца в одну лунку 96-луночного ПЦР-планшета добавляли 10 мкл крови, 40 мкл мастер-микса для лизиса и 20 мкл SPB и 10 раз перемешивали путем пипетирования раствора.Планшет запечатывали и инкубировали в течение 10 минут при 56 °C на термоциклере с нагретой крышкой. Затем планшет помещали на магнит для планшетов на 5 мин, супернатант удаляли и добавляли 150 мкл 80 % этанола. После инкубации в течение 30 с на магните этанол удаляли, а планшет снимали с магнита. Гранулы ресуспендировали в 30 мкл воды и были готовы для подготовки библиотеки.

Слюну собирали в пробирки для сбора ДНК Oragene DNA Saliva Collection (DNA Genotek, кат.OGR-500, OGD-510), которые инкубировали не менее 1 часа при 50 °C для лизиса клеток перед тщательным перемешиванием встряхиванием. Для каждого образца 20 мкл воды и 30 мкл слюны добавляли в одну лунку 96-луночного ПЦР-планшета и медленно перемешивали с помощью пипетки. Затем в лунку для образца добавляли 20 мкл SPB и гранулы тщательно перемешивали, 10 раз пипетируя раствор. Планшет инкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре, а затем помещали на пластинчатый магнит на 5 минут. Супернатант удаляли и к осадку шариков добавляли 150 мкл 80% этанола.Затем пластине давали постоять в течение 30 с на магните перед удалением этанола, а затем удалением пластины с магнита. Гранулы ресуспендировали в 30 мкл воды и были готовы для подготовки библиотеки.

Вводимое количество ДНК и нормализация

Влияние вводимого количества ДНК на выход и размер вставки оценивали путем приготовления библиотек из 1 нг, 10 нг, 25 нг, 50 нг, 100 нг, 250 нг, 500 нг или 1 мкг NA12878. Выходы библиотеки сравнивали для различных вводимых количеств, чтобы определить, при каком входном пороге гранулы становятся насыщенными.Влияние вводимого количества на средний размер вставки определяли путем секвенирования библиотек на MiSeq.

Дополнительные эксперименты были проведены для оценки библиотек, приготовленных из небольших количеств ДНК. Библиотеки готовили с использованием от 0,01 нг до 100 нг NA12878. Стандартный протокол применялся для всех библиотек, за исключением того, что для ввода менее 1 нг добавлялся один цикл ПЦР для каждого уменьшения вдвое введенного количества. Каждую библиотеку загружали на одну дорожку HiSeq X и секвенировали с 2 × 150 считываний парных концов.Образцы были проанализированы с использованием приложения для секвенирования всего генома BaseSpace™ и инструмента оценки вариантов 3. 0.0 (Illumina).

Влияние изменения условий подготовки библиотеки

Влияние условий ПЦР на возможность вызова также оценивали путем приготовления библиотек из 100 нг NA12878 в соответствии со стандартным протоколом, но с использованием 2, 3, 4 или 5 циклов ПЦР. Возможность вызова описывает процент базовых вызовов в наборе данных, которые проходят метрики качества, необходимые для вызова генотипа; учитываются базовое качество, качество выравнивания и минимальные уровни покрытия.

В процессе оценки оптимальных условий очистки после амплификации оценивалось влияние изменения условий очистки на библиотеку и результирующие параметры секвенирования. Стандартный протокол библиотеки, описанный выше, использовали с модификацией протокола очистки после амплификации. Ввод ДНК для этих экспериментов составлял 100 нг. Во-первых, однократная очистка SPB (концентрация гранул 0,7X) сравнивалась с двойной очисткой SPB (концентрация гранул 0,5X на первом этапе очистки и 0.7-кратная концентрация шариков на втором этапе очистки). Для этого эксперимента оценивали влияние на библиотеку (профиль размера вставки, медианный размер вставки) и параметры секвенирования (вырезанные основания). Во-вторых, ввод объема гранул варьировался либо при первой (22–67 мкл; объем 40 мкл воды без нуклеаз, используемой для разбавления гранул, был фиксированным), либо при второй (8–24 мкл) очистке, сохраняя вторую и первую фиксированные объемы шариков соответственно. Библиотеки анализировали на биоанализаторе для определения среднего размера фрагмента библиотеки, а выход ДНК определяли с помощью Qubit.

Подготовка библиотеки из ампликонов, плазмид и малых геномов

Используя NA12878 в качестве источника, были созданы ампликоны для генов человеческого лейкоцитарного антигена (HLA): HLA-A (4,1 т.п.н.), HLA-B (2,8 т.п.н.). ), HLA-C (4,2 КБ), HLA-DPA1 (10,3 КБ), HLA-DPB1 (9,7 КБ), HLA-DQA1 (7,3 КБ), HLA-DRB2 (4,6 КБ) ) и HLA-DQB1 (7,1 КБ). Ампликоны готовили в соответствии с рекомендованным протоколом для панели секвенирования TruSight HLA v2 (Illumina, кат. нет. 20007429). После амплификации продукты ПЦР очищали в массе с помощью 0,7-кратной концентрации SPB перед переносом 50 нг каждого из них на 1% агарозный гель. Библиотеки Nextera DNA Flex были приготовлены из 1 нг и от 100 до 300 нг каждого ампликона; Для HLA-B и DPA1 использовали входные данные 100 нг, для всех остальных ампликонов использовали входные данные 300 нг. Пулы библиотек TruSight HLA готовили с использованием панели секвенирования TruSight HLA v2 (Illumina, каталожный номер 20000215): 1 нг каждого ампликона помечали индивидуально, 10 мкл каждого меченого ампликона объединяли перед очисткой с помощью SPB; протокол, рекомендованный производителем, был соблюдён, за исключением этапа «Нормализация ампликонов HLA PCR», где два пула ампликонов были количественно определены вручную для обеспечения соответствия протоколу Nextera DNA Flex.Были определены профили размеров фрагментов и выходы библиотек, затем библиотеки были секвенированы с помощью NextSeq и определено покрытие при уменьшении выборки до 25 000 прочтений на ампликон.

Ампликоны митохондриальной ДНК человека (мтДНК) были получены из NA12878 с использованием Руководства по геному мтДНК человека (Illumina, Руководство по геному мтДНК человека [15,037,958 01]). В соответствии с этим протоколом для создания ампликонов мтДНК размером 9,1 кб и 11,2 кб использовали две пары праймеров. Оба ампликона покрывают область петли некодирующего смещения (D); охват этой области важен, поскольку изменения в этой области присутствуют при многих видах рака.Библиотеки были приготовлены из 1 нг и 100 нг входных данных обоих ампликонов с использованием набора Nextera DNA Flex и из 1 нг входных данных с использованием набора для подготовки библиотеки ДНК Nextera XT (Illumina, кат. № FC-131-1024, FC-131-1096). ). Библиотеки были секвенированы на NextSeq™ 550 и разделены на подвыборки до 25 000 прочтений на образец. Охват различных наборов для подготовки библиотек сравнивали по всему митохондриальному геному.

Библиотеки Nextera DNA Flex были приготовлены с использованием 1 нг исходных продуктов ПЦР E. coli разного размера (50 п.н. – 3 т.п.н.).Профили размеров фрагментов библиотек определяли с использованием биоанализатора, а библиотеки секвенировали на MiSeq для определения охвата при уменьшении выборки до 25 000 прочтений на образец. «Пониженная выборка» означает, что общее количество прочтений последовательности для данного образца было уменьшено до указанного значения с помощью приложения BaseSpace FASTQ 2.2.0, при этом приложение случайным образом выбирает указанное количество прочтений; это облегчает сравнение охвата между выборками, поскольку каждая выборка с уменьшенной выборкой имеет одинаковое количество прочтений.Библиотеку также готовили из ампликона размером 3 т.п.н. E. coli с использованием Nextera XT в соответствии с рекомендациями производителя. Было проведено сравнение охвата геномов E. coli , созданных из библиотек ампликонов Nextera DNA Flex и Nextera XT размером 3 т.п.н.

Пригодность набора Nextera DNA Flex для малых геномов оценивалась с использованием трех видов бактерий с низкой ( B. cereus , 35%), средней ( E. coli , 51%) и высокой ( R. sphaeroides , 69%) содержание GC.Библиотеки были приготовлены из 0,5 нг, 1 нг и 10 нг гДНК каждого вида с использованием 12, 10 и 8 циклов ПЦР соответственно для различных исходных данных ДНК. Определяли выход библиотеки, размер фрагмента, размер вставки и покрытие.

Применение к различным видам и типам образцов

Широкая применимость набора Nextera DNA Flex была определена путем его применения к целому ряду видов с малыми и большими/сложными геномами и различным типам образцов. Библиотеки были приготовлены из 100 нг входных данных человека (NA12878), ангуса, арабидопсиса, мыши, люцерны, E.coli и гДНК B. cereus . Профиль размера фрагмента каждой библиотеки определялся анализатором фрагментов.

Мы оценили возможность создания библиотек из некачественных образцов. Это включало подготовку библиотек из 100 нг обработанных формалином количественных мультиплексных эталонных стандартов легкой (Horizon, кат. № HD798), умеренной (Horizon, кат. № HD799) или тяжелой (Horizon, кат. № HD803) степени, а также в качестве соответствующего контроля (Horizon, номер по каталогу HD729 Tier 5). Из-за деградировавшего характера образца мы внесли три корректировки в рабочий процесс: во-первых, ДНК была «восстановлена» с помощью стандартного набора для восстановления FFPE (Illumina, кат.нет. WG-321-1002) для улучшения качества ДНК; во-вторых, мы увеличили количество циклов ПЦР с 5 до 8 для повышения выхода; в-третьих, поскольку мы ожидаем более мелкие фрагменты, мы использовали односторонний выбор размера SPRI с 1,8-кратным объемом SPB, чтобы увеличить выход и очистить более мелкие фрагменты, ожидаемые от маркировки деградированной ДНК. С увеличением фиксации происходило падение выхода библиотеки и уменьшение размера фрагмента. Однако, несмотря на проблемы с деградировавшей ДНК, модификации протокола позволили увеличить выход (~ 150–400 нМ, 24–110 нг/мкл) по сравнению со стандартным протоколом, и во всех случаях библиотеки были созданы в достаточном количестве для многократного использования HiSeq. Х бежит.Библиотеки также были приготовлены из донорских образцов FFPE в соответствии с приведенным выше протоколом.

Сравнение различных наборов для подготовки библиотек

Эффективность подготовки библиотек для больших геномов сравнивалась между Nextera DNA Flex и некоторыми другими коммерчески доступными наборами для подготовки библиотек. Наборы для подготовки библиотеки от Illumina, использованные для сравнения с Nextera DNA Flex, включали: Nextera DNA, TruSeq Nano (Illumina, каталожные номера FC-121-4001, FC-121-4002, FC-121-4003) и TruSeq DNA PCR- бесплатно (Illumina, кат.№№ FC-121-3001, FC-121-3002, FC-121-3003). Наборы компараторов сторонних производителей включали набор для подготовки библиотеки ДНК NEBNext Ultra (New England BioLabs, кат. номер E7370S), наборы Kapa HyperPrep (Roche, кат. Наборы HyperPlus (Roche, кат. № KK8512 [с амплификации библиотеки], KK8513 [без ПЦР]). Библиотеки были приготовлены из 100 нг NA12878 в соответствии с инструкциями производителей для каждого набора и секвенированы на HiSeq X с шестью образцами на проточную кювету. Анализ 30-кратных сборок генома человека был выполнен с использованием двух приложений BaseSpace, WGS 6.0.0, а затем VCAT 3.0.0 (Illumina).

Анализ секвенирования

В описанных здесь экспериментах использовались различные секвенаторы Illumina, чтобы продемонстрировать совместимость этого набора для подготовки библиотеки со всеми секвенаторами Illumina; выбор секвенатора для использования в данном эксперименте определялся на основе количества и типа образцов и желаемой глубины секвенирования. Приложениями BaseSpace, используемыми для анализа построения генома человека, были секвенирование всего генома v6.0.0, полногеномное секвенирование версии 5.0.0, инструмент оценки вариантов вызова версии 3.0.0, набор инструментов FASTQ версии 2.2.0 и интегрированное средство просмотра геномики версии 2.1.2. Приложениями BaseSpace, используемыми для анализа малых геномов и ампликонов, были BWA aligner v1.1.4, ассемблер генома SPADEs v3.9.0, Enrichment v3.0.0, mtDNA Variant Processor v1. 0.0, mtDNA Variant Analyzer v1.0.0 и Integrated Genomics Viewer v2.1.2.

Определение однородности охвата включало оценку охвата мотивов смещения, которые, как известно, инкапсулируют общие источники смещения охвата [10]: низкий GC, высокий GC, высокий GC, высокий AT, высокий AT, повторы AT и области, богатые G или C.Для областей размером не менее 200 п.н. были назначены крайние значения содержания нуклеотидов, когда средние 100 оснований можно было классифицировать следующим образом: «низкое», 10 % или менее указанных нуклеотидов; «высокий», 75% или более указанных нуклеотидов; «огромный», 85% или более указанных нуклеотидов; например, высокое содержание GC указывает на содержание GC не менее 75% в центральных 100 п.н. «at_diнуклеотиды» обозначали участки из 130 оснований, в которых средние 30 оснований были повторяющимися динуклеотидами AT. «Обогащенный G» или «богатый C» обозначал области из 130 оснований, в которых средние 30 оснований содержали по меньшей мере 80% G или 80% Cs соответственно.

Автоматизация подготовки библиотеки для высокопроизводительных приложений

Набор для подготовки библиотеки Nextera DNA Flex был протестирован на различных платформах для работы с жидкостями. Библиотеки готовили с использованием от 200 до 300 нг гДНК человека. Полученные библиотеки секвенировали до 30-кратной глубины в системе HiSeqX. Библиотеки были подготовлены на системах NGS STAR (Hamilton), epMotion 5075 t (Eppendorf), Biomek i7 (Beckman), Freedom Evo (Tecan), Sciclone (PerkinElmer) и Bravo NGS (Agilent); за исключением Agilent, все остальные перечисленные поставщики являются партнерами Illumina по автоматизации.Данные были получены во время тестирования автоматизированных методов для получения статуса квалифицированного Illumina.

Бусины для волос на клипсах

Да, они все еще существуют! Если вы купили одну из этих машин для плетения/плетения в конце 90-х — начале 00-х годов и к ней прилагалась упаковка маленьких бусинок пони на клипсах, вы понимаете, о чем мы говорим 😉 Пластиковые бусины для волос на клипсах — это немного больше, чем стандартные бусины пони, и имеют зубцы внутри для хорошего, крепкого захвата. Они лучше всего подходят для дредов, косичек и завитков, но зубья также помогут им оставаться в распущенных локонах, если вы будете осторожны.

  • Я пинаю голень

    Бусины для волос на клипсах, неоново-фиолетовый
    Добавить в корзину
  • Я пинаю голень

    Бусины для волос на клипсах, ярко-синие
    Добавить в корзину
  • Я пинаю голень

    Бусины для волос на клипсах, фуксия
    Добавить в корзину
  • РастАфри

    Украшения для волос с кристаллами, золото
    Выберите параметры
  • РастАфри

    Украшения для волос с кристаллами, розовое золото
    Выберите параметры
  • РастАфри

    Украшения для волос с кристаллами, серебро
    Выберите параметры
  • РастАфри

    Роскошные украшения для волос, розовое золото
    Выберите параметры
  • РастАфри

    Роскошные украшения для волос, золото
    Выберите параметры
  • РастАфри

    Роскошные украшения для волос, серебро
    Выберите параметры
  • Я пинаю голень

    Бусины для волос на клипсах, розовые
    Добавить в корзину
  • Я пинаю голень

    Бусины для волос на клипсах, богомол
    Добавить в корзину
  • Город красоты

    Быстрый инструмент для бисероплетения
    Добавить в корзину
  • Город красоты

    Инструмент для заправки микропетли
    Добавить в корзину

Медальоны и бусины для ожерелий с индивидуальной печатью

Изготовленные на заказ леи с медальонами, ожерелья из бисера Марди Гра и медальоны с логотипом

Наши изготовленные на заказ ожерелья из бисера Марди Гра с медальонами, медальоны нестандартной формы с разноцветными бусинами и изготовленные на заказ медальоны из цветочных леев являются чрезвычайно популярными товарами для компаний и частных лиц, планирующих предстоящие фестивали и события, такие как Марди Гра, День Святого Патрика или любые другие праздники, такие как Рождество или даже Новый год.

Изготовленные на заказ медальоны с логотипом вашей компании на ярких ожерельях из бисера не могут не привлечь внимание людей.

Для Марди Гра у нас есть отпечатанные медальоны с бусинами ожерелья, праздничный медальон для открывания бутылок Марди Град с бусинами, стеклянный медальон Маргариты с бусинами, медальоны с геральдическими лилиями и разноцветными бусинами ожерелья и медальоны. Для ночных событий не забудьте проверить наши светящиеся в темноте бусины-медальоны! Ожерелья из бисера без надписей в огромном ассортименте цветов также доступны в разной длине на нашем веб-сайте для продажи — обязательно ознакомьтесь с ними — эти красочные ожерелья из бисера без надписей готовы к отправке на следующий день после размещения вашего заказа.

Ко Дню Святого Патрика закажите наши зеленые медальоны с зелеными бусинами на шее, зеленое свечение в темноте и сопутствующие бусы на колье, медальон с зелеными бусинами и нашу уникальную открывалку для бутылок в виде медальона Лепрекона с бусинами на колье.

Но мы не просто носим ожерелья из бисера и медальоны с рекламными логотипами для Марди Гра и Дня Святого Патрика. Наш изготовленный на заказ медальон Sombrero с ожерельем из бисера и медальоны для открывания бутылок Cinco De Mayo с бисером отлично подходят для знаменитого мексиканского фестиваля Cinco De Mayo.Медальоны в шапке Санта-Клауса с красными бусинами отлично подходят для Рождества, колье с медальоном из бисера Cannabis может быть напечатано с вашим рекламным логотипом для 420 — Cannabis Culture — 20 апреля, а наши футбольные медальоны с бусинами в виде ожерелья — превосходные рекламные предметы для футбольного сезона.

Закажите наши нестандартные леи, медальоны оптом и бусы для ожерелий сегодня — оживите и оживите свои мероприятия!

DeliBeads

50% СКИДКА НА ДОСТАВКУ НА ВСЕ ЗАКАЗЫ СВЫШЕ 49 долларов США.99


DELI-BEADS NEW S:

 

05 января 2020 г. :  Ознакомьтесь с нашими недавно добавленными иглами для бисероплетения TULIP! . . .
НАСТОЯТЕЛЬНО рекомендуется использовать эти иглы. Они гибкие с небольшой «податливостью», но достаточно жесткие, чтобы их нельзя было легко согнуть или сломать; хорошо стоит цена!
21 июня 2019 г. :   УЖЕ В НАЛИЧИИ ! .. . 23 новых шарика Miyuki «DURACOAT» Delica 11/0:   
#DB-2351 — #DB-2368 и #DB-2521 — #DB-2525. 11 июня 2018 г. :   ТОЛЬКО ПРИБЫЛИ ! . . . 26 новых бусин «Fancy-Lined» 11/0 Miyuki Delica:

#DB-2371 через #DB-2396.

 

*УВЕДОМЛЕНИЕ : #DB-0336 — матовое луженое покрытие, снято с производства компанией Miyuki. Доступность ограничена.

 

Сентябрь 2017 г. : ТОЛЬКО ПРИБЫЛИ! . . . 6 Новые бусины «Picasso» 11/0 Miyuki Delica:

Karen W., Калифорния, США
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —
Привет, я получил свой заказ в ОДИН день! Я был в шоке от того, как быстро я это сделал! Я проверил, откуда оно взялось, и с удивлением увидел, что вы в Санкт-Петербурге.Пол, МН. Как я рада, что нашла вас. Я искал лучшую цену на бисер и нашел ваш сайт. Итак, мой заказ от вас сделал мой день. . . Спасибо! 🙂

Барс И., Миннесота, США
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —
Слишком часто мы слишком заняты, чтобы отправить записку с надписью «Спасибо!». Ваше внимание к деталям удивительно.Все четко промаркировано, красиво упаковано и оперативно доставлено. Несмотря на то, что я живу в Канаде, и доставка занимает немного больше времени, мне стоит покупать у кого-то, кто гордится тем, как все делается.

Это мой второй (конечно, не последний) заказ, и это был своего рода тест, чтобы убедиться, что вы слишком хороши, чтобы быть правдой, но такое же внимание к деталям было и тогда, когда я открыл эту посылку.

Большое спасибо за прекрасный выбор и отличное обслуживание клиентов.Можете поспорить, что я расскажу всем своим друзьям-бисеристам о вашем магазине.

Терри Б., Калгари, Альберта, Канада
9027 — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —   —
Просто чтобы вы знали, что мои бусы прибыли в целости и сохранности и очень быстро. Большое спасибо за отличное обслуживание клиентов. Ждем повторного заказа. Хорошего дня!

Гейл Б., Британская Колумбия, Канада
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —
Я просто хотел скажите спасибо за оперативный ответ. Я заказывал в других компаниях, и обычно они отправляют мой заказ в течение недели. Благодаря вашему быстрому ответу, теперь я буду заказывать только у вас. Молодец!

Cheryl B.-m., Tennessee, USA
9027 — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —   —   —
Вау, спасибо за вашу честность и преданность обслуживанию клиентов, даже заметив, что у меня было два заказа, взяв на себя смелость объединить их И вернуть мне стоимость доставки.Я забыл один проект, поэтому второй заказ, но был готов съесть дополнительные расходы, так как ваши цены такие потрясающие. Таким образом, вы не только сэкономили мне «$$» , но и возместили мои дополнительные расходы на доставку! Я АБСОЛЮТНО буду использовать вас снова в самом ближайшем будущем.

Lyza B., Вирджиния, США
9027
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —
Просто хотел, чтобы вы знали, что я получил свой самый первый заказ от Deli-Beads.Я согласен, разместить мой заказ и получить его через несколько дней действительно очень быстро. Я останусь клиентом Deli-Beads. Я делал покупки в других местах, где можно купить бусы, но никто не превосходит Deli-Beads по быстрому и очень дружелюбному обслуживанию. Обязательно буду рекомендовать Deli-Beads своим друзьям.

Марси В., Колорадо, США
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —
Я просто хотел сказать спасибо за удивительно быструю доставку. Жаль, что я все еще жду свой ткацкий станок из другого источника. Я определенно буду постоянным клиентом!!


Дженнифер Б., Канзас, США
9027
— — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — —   —
Привет, я просто хотел сообщить вам, что я получил свой заказ быстро, как и все остальные. Приятно иметь возможность зависеть от компании, доставляющей свои заказы своевременно.Когда я размещаю заказ, я хотел бы получить его через 3-5 дней, но большинство других людей и/или компаний, с которыми я имел дело в последнее время, похоже, не заботятся о том, когда вы получите свой заказ. Большое спасибо!

Линда М., Луизиана, США

 

 

Применение анализа кариотипа в сочетании с BAC-on-Beads для пренатальной диагностики

Введение

Синдром Дауна (СД), также известный как трисомия 21 синдром, является наиболее распространенным хромосомным заболеванием человека (1). Заболеваемость у новорожденных колеблется от от 1/800 до 1/1000 (2). Инциденты Синдромы трисомии 18 и трисомии 13 уступали только синдромам синдром трисомии 21 (3). Главная особенности клинических проявлений – тяжелые врожденные умственная отсталость и уникальные черты лица, которые часто сопровождаются различными врожденными пороками развития или другими аномалии (4). Эти синдромы нельзя вылечить. Пренатальная диагностика – единственный способ предотвратить рождение детей с дефектами (5). Поэтому ранний скрининг, ранняя диагностика и своевременное прекращение беременности являются важными мерами по уменьшению врожденных дефектов (6).

Традиционная пренатальная диагностика фактически обычный анализ кариотипа хромосом плода, который выявляет ограниченные типы хромосомных аномалий, и требуется больше времени для получить результаты (7). Пренатальный BAC-on-Beads (BoBs) — это недавно разработанный и эффективный молекулярный диагностическая методика. Эта новая технология позволяет быстро обнаруживать 5 общие анеуплоидные аномалии (21, 18, 13, X, Y) и 9 распространенных также микроделеционные синдромы (8).

В целях повышения уровня пренатальной диагностики и снизить частоту врожденных дефектов, в этом исследовании пренатальные BoBs анализ проводили вместе с традиционным кариотипом анализ, направленный на изучение потенциальных преимуществ сочетания Два метода тестирования в пренатальной диагностике.

Субъекты и методы
субъектов

Всего было госпитализировано 558 беременных женщин. Больница охраны здоровья матери и ребенка Сюйчжоу с июля 2015 г. по Июнь 2017 года были зачислены в это исследование. Все испытуемые дали свои информированное согласие на исследование. В 19–24 недели беременности субъекты прошли амниоцентез для анализа кариотипа в сочетании с анализом BoBs амниотической жидкости. Предродовые состояния беременных включены женщины: пожилой материнский возраст, высокий риск с дородовым скрининг, аномальные результаты при неинвазивном пренатальном тестировании (НИПТ), ультразвуковые аномалии плода, хромосомные аномалии у беременных женщин или их мужей и предшествующих рождений ребенка с хромосомными аномалиями. Исследование было одобрено Комитет по этике Центра охраны здоровья матери и ребенка Сюйчжоу Больница.

Методы
Амниоцентез

Субъекты подписали форму информированного согласия до прохождение процедуры. Амниоцентез проводили под ультразвуковое руководство. Изъято амниотическая жидкость (25 мл), из них 20 мл культивировали для анализа кариотипа хромосом, а оставшиеся 5 мл использовали для анализа BoBs.

Хромосомный анализ кариотипа

Около 20 мл амниотической жидкости было центрифугировали при 2500×g в течение 10 мин при 4°C для отделения амниотических клетки.Клетки культивировали, собирали и помещали на стекло. слайды после рутинной обработки для анализа G-хромосомы. На каждом предметном стекле исследовали 30 окрашенных метафаз и 5 кариограммы были созданы для анализа хромосом. Если подозрительный обнаружены хромосомные аномалии или хромосомный полиморфизм, затем количество метафаз увеличивали до 50, а количество кариограмм было увеличено до ≥20 для более надежного результата.

Анализ BoBs

Геномную ДНК экстрагировали примерно из 5 мл амниотической жидкости с использованием реагентов для выделения ДНК согласно инструкции производителя.Комплект BoBs (Perkin Elmer, Waltham, MA, США) использовали для анализа BoBs. Шарики анализировали с помощью Система цитометрического сбора данных Luminex 200 (Остин, Техас, США) для сбор информации. Данные были проанализированы с использованием программного обеспечения BoBsoft 2.0.

Наблюдаемые индикаторы

Испытуемые были разделены на наблюдателей и контрольные группы. Анализ кариотипа проводили на контроле. группа, и анализ BoBs был выполнен на группе наблюдения. То были обобщены основные технические показатели, а случаи Хромосомные аномалии были дополнительно оценены.

Статистический анализ

Статистический анализ выполнен с использованием SPSS 19.0 (IBM SPSS, Армонк, Нью-Йорк, США). Сравнение между несколько групп было выполнено с использованием одностороннего теста ANOVA с последующим пост-тестированием. hoc-тест (наименее значимое различие). P<0,05 считалось для обозначения статистически значимой разницы.

Результаты
Сравнение анализа кариотипа (контрольная группа) и анализ BoBs (группа наблюдения)

Время обнаружения было короче в группе наблюдения (методика BoBs), чем в контрольной группе, и количество хромосомных локусов было меньше, чем в контрольной группе.Однако к диапазону обнаружения добавились еще 9 микроделеций. (Таблица I).

Таблица I.

Анализ кариотипа (контрольная группа) и Анализ BACs-on-Beads (группа наблюдения).

Таблица I.

Анализ кариотипа (контрольная группа) и Анализ BACs-on-Beads (группа наблюдения).

Группы Test Time Проверенные предметы
Наблюдение 24 H 21, 18, 13, X, Y хромосом и 9 микроделеций
Контроль 3 недели 46 хромосом
Количество амниоцентезов, выполненных для беременные группы высокого риска с различными внутриутробными состояниями

Амниоцентез в основном проводили беременным женщинам с высоким риском с пренатальным скринингом (неинвазивным положительным не включались), беременные женщины старшего материнского возраста (неинвазивный положительный результат не включался) и беременных женщин с половые хромосомные аномалии при НИПТ (табл. II и III).

Таблица II.

Пренатальные состояния высокого риска беременных женщин, перенесших амниоцентез.

Таблица II.

Пренатальные состояния высокого риска беременных женщин, перенесших амниоцентез.

Пренатальный условия Случаи
Трисомия 21 с неинвазивное пренатальное тестирование 60
Трисомия 18 с неинвазивное пренатальное тестирование 16
Трисомия 13 с неинвазивное пренатальное тестирование 1
Половые хромосомы аномалии при неинвазивном пренатальном тестировании 61
Высокий риск с пренатальный скрининг (не включая положительные результаты с неинвазивное пренатальное тестирование) 195
Пожилой возраст матери (не включая положительные результаты неинвазивной пренатальной тестирование) 128
Аномальные результаты с цветным доплером (не включая положительные результаты с неинвазивное пренатальное тестирование) 56
Хромосомный аномалии у беременных женщин или их мужей 17
Предыдущие роды ребенок с хромосомными аномалиями 54
Итого 588

0 9 ТаблицаIII. III.

Исходы пренатальной диагностики беременных с различными предродовыми состояниями.

Таблица III.

Исходы пренатальной диагностики беременных с различными предродовыми состояниями.

9054 1 9054 1 9052
Исходы диагностики беременных в группе наблюдения и контрольной группе

Результаты теста на хромосомные аномалии показали что диагностические результаты двух групп были сходными при трисомии 21, трисомия 18, трисомия 13 и половые хромосомные аномалии. В контроле обнаружена сбалансированная транслокация хромосом. группе, но не в группе наблюдения. Хромосомная микроделеция были обнаружены в группе наблюдения, но не в контрольной группа. Два теста дополняют друг друга, и разница статистически значимо (p<0,05) (табл. IV).

Диагностика результат

Пренатальный состояния Трисомия 21 Трисомия 18 Трисомия 13 Половые хромосомы аномалии Сбалансированная хромосома транслокация Хромосома микроделеция
Положительные результаты с неинвазивным пренатальным тестированием (T21, T18 и T13) 60 16 1 24 0 0
09 с высоким риском пренатальный скрининг (не включая положительные результаты с неинвазивное пренатальное тестирование) 2 0 0 2 0 0
Пожилой материнский возраст (не включая положительные результаты неинвазивной пренатальной тестирование) 3 0 0 1 0 0
Аномальные результаты с цветным доплером (не включая положительные результаты с неинвазивное пренатальное тестирование) 9 4 0 0 1 1
Хромосомный аномалии у беременных женщин или их мужей Ребенок с хромосомные аномалии 0 0 0 0 0 0
Total Case 75 20 27 12 1
Таблица IV.

Сравнение результатов диагностики между группой наблюдения и контрольной группой.

Таблица IV.

Сравнение результатов диагностики между группой наблюдения и контрольной группой.

9054 9 9054 9 9054 27
Группы Трисомия 21 Трисомия 18 Трисомия 13 Половые хромосомы аномалии Сбалансированная хромосома транслокация Хромосома Microdelet
75 75 20 0 9 9542 75 95 20 1 12 0
Сообщения о нормальных результатах с BoB анализ

ДНК-зонда были добавлены к флуоресцентно-меченому (красные) микросферы. После амплификации методом ПЦР и флуоресценции маркировка (синий цвет) определяли генотипы образцов. Рис. 1 и 2 показывают геномную последовательность нормальных самцов. и самки.

Аномальные результаты анализа BoBs

Выбор целей очень специфичен. Меню на основе обнаружение может быстро обнаружить анеуплоидию 21-трисомии, которая может компенсировать ограничения анализа кариотипа. На рис. 3 показаны результаты обнаружения BoB. для пренатальной 21-трисомии.

Обсуждение

Население Китая в настоящее время составляет 1 человек.4 миллиарда и является первой по численности населения страной в мире. Не только рождаемость самая высокая в мире, но общее число родившихся дефекты также занимают первое место в мире (9). Предыдущие исследования подтвердили, что трисомия 21 является наиболее распространенным типом врожденных дефектов у новорожденных, затем трисомия 18, трисомия 13 и анеуплоидия пола хромосомы X и Y (10). То настоящая стратегия лечения врожденных дефектов, обусловленных хромосомными патологии является проведение вторичной профилактики, т. е. вмешательство посредством пренатального скрининга и диагностики (11).Анализ кариотипа после амниоцентез был золотым стандартом пренатальной диагностики в предыдущие исследования (12), которые высокочувствительный и специфичный, и имел почти 100% пренатальный Частота диагностики хромосомных аномалий плода. Однако технология требует более длительного периода времени для получения результатов и имеет низкое разрешение, поэтому возможно обнаружение только более крупных мутаций. разрешается. Кроме того, анализ кариотипа требует высокого уровня квалификации. обрабатывать образцы хромосом, а результаты интерпретировать с высокая субъективность и в случае неудачной амниотической жидкости культуре клеток, весь эксперимент оказывается напрасным (13,14).

Пренатальная технология BoBs представляет собой цитогенетический анализ экспресс пренатальная диагностика. Результаты, полученные из хромосомы анализа характерны как для нормального мужчины, так и для нормальной женщины. В этом анализе требовалось небольшое количество образца ДНК. анализ нескольких хромосом и поиск аномалий. Трисомия 21 послужил примером аномального результата. Кроме того, анализ BoBs требуется меньше времени для получения результатов, чем при традиционном кариотипе анализ. В типичном анализе результаты могут быть получены в течение 24 ч, что значительно снижает тревожность и снимает психологическое напряжение у беременных группы высокого риска.За исключением быстрых результатов, это технология также обеспечивает высокую производительность за счет анализа более 92 образцы одновременно (15). С помощью молекулярного кариотипирования геномная ДНК в идентифицированной мишени участок амплифицируется и обнаруживается целевая делеция (16). Помимо выявления анеуплоидии хромосомы 13, 18, 21 и половые хромосомы X и Y (17), технология BoBs допускает аберрацию обнаружение в 9 дополнительных тщательно выбранных областях микроделеций (18). Таким образом, точность диагностики могут быть улучшены, а недостатки в культуре аномальных клеток для анализ кариотипа может быть в некоторой степени компенсирован (19,20).

В этом исследовании для изучения клинических применение анализа BoBs в сочетании с анализом кариотипа, результаты полученные с помощью анализа BoBs, сравнивали с результатами, полученными с помощью традиционный анализ кариотипа у тех же включенных в исследование беременных женщин. Два метода тестирования дали точно такую ​​же диагностику. исходы при выявлении трисомии 21, трисомии 18, трисомии 13, и половые хромосомные аномалии. Сбалансированная хромосома транслокацию выявляли только при анализе кариотипа (контроль группе), в то время как микроделецию хромосом выявляли только BoBs анализ (группа наблюдения).Таким образом, два метода тестирования были дополняют друг друга.

В заключение, анализ кариотипа в сочетании с BoBs технология пренатальной диагностики была проста в исполнении и обеспечивала быстрые результаты с высокой точностью. Совместное использование двух тестов методы значительно улучшили скорость диагностики хромосомных аномалий, тем самым уменьшая врожденные дефекты и направляя продолжающиеся беременности у беременных группы высокого риска.

Благодарности

Не применимо.

Финансирование

Это исследование было профинансировано The First Batch of Training Проект резервной медицинской молодежи в Сюйчжоу (№2014011).

Наличие данных и материалов

Наборы данных, использованные и/или проанализированные в ходе настоящего исследование доступно у соответствующего автора на разумных запрос.

Вклад авторов

YF и GW внесли значительный вклад в написание рукопись и проведен амниоцентез. LG помогла с кариотипом анализ хромосом. JW и FS выполнили анализ BoB. МГ и ЛГ интерпретируемый статистический анализ. Все авторы прочитали и одобрили итоговое исследование.

Одобрение этики и согласие на участвовать

Настоящее исследование было одобрено Этическим комитетом. Комитет больницы материнства и детства Сюйчжоу. Подписанные информированные согласия были получены от пациентов или опекуны.

Согласие пациента на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересы.

Каталожные номера

1

Бьянка И., Герачи Г., Гулиция М.М., Ассенца Эгиди Г., Бароне С., Кампизи М., Алаймо А., Адорисио Р., Комольо Ф., Фавилли С. и др.: Консенсусный документ Итальянской ассоциации Госпитальные кардиологи (ANMCO), Итальянское педиатрическое общество кардиологии (SICP) и Итальянского общества гинекологов и Акушерство (SIGO): Беременность и врожденные пороки сердца.Евро Приложение Heart J. 19 Приложение D:D256–292. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

2

Пандья ВК и Сутария ХК: односторонний Мультикистозная дисплазия почек: Пренатальная диагностика на УЗИ. Саудовская J Kidney Dis Transpl. 28:916–920. 2017. PubMed/NCBI

3

Чой К.В., Квок Ю.К., Ченг Ю.К., Вонг К.М., Вонг HK, Leung KO, Suen KW, Adler K, Wang CC, Lau TK и др.: Диагностика точность анализа BACs-on-Beads™ по сравнению с кариотипированием для пренатальное выявление хромосомных аномалий: ретроспектива последовательный ряд случаев.БЖОГ. 121:1245–1252. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

4

Грати Ф.Р., Гомес Молина Д., Феррейра Х.С., Dupont C, Alesi V, Gouas L, Horelli-Kuitunen N, Choy KW, García-Herrero S, de la Vega AG и др.: Распространенность рецидивирующего патогенные микроделеции и микродупликации более чем в 9500 беременности. Пренат Диагн. 35:801–809. 2015. Просмотр статьи : Google Scholar : PubMed/NCBI

5

Маркато Л. , Туролла Л., Помпилии Э., Дюпон К., Груши Н., Де Тоффол С., Бракаленте Г., Бакро С., Тройло Э., Табет AC и др.: Пренатальный фенотип синдрома Вильямса-Бёрена и синдром реципрокного удвоения.Clin Case Rep. 2: 25–32. 2014. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

6

Розенфельд Дж. А., Мортон С. А., Хаммель С., Sulpizio SG, McDaniel LD, Schultz RA, Torchia BS, Ravnan JB, Эллисон Дж.В. и Фишер А.Дж.: Опыт использования экспресс-анализа для обнаружение анеуплоидии и микроделеций/микродупликаций в более 2900 пренатальных образцов. Диагностика плода Тер. 36:231–241. 2014. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

7

Мэй Дж, Ван Х и Чжан Л: 10p15.3р13 дупликация, унаследованная от транслокации отцовского баланса (46,XY,t(5;10)(q35.1;p13)) выявлено при неинвазивном пренатальном тестирование. J Obstet Gynaecol Res. 43:1076–1079. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

8

Гарсия-Эрреро С., Кампос-Галиндо I, Мартинес-Конехеро Х.А., Серра В., Олмо И., Лара С., Симон С. и Рубио С.: Технология BAC-on-Beads: надежный тест для быстрого обнаружения анеуплоидии и микроделеции в пренатальной диагностике.Биомед Рез Междунар. 2014:52014. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

9

Чой Р.К., Чен И, Сун XF, Квок Ю.К. и Люн TY: BAC-на-гранулах: новый надежный и быстрый метод обнаружения пренатальная диагностика. Эксперт Rev Mol Diagn. 14: 273–280. 2014. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

10

Piotrowski K, Halec W, Wegrzynowski J, Петшик А., Хенкельман М. и Заячек С.: Пренатальная диагностика Синдром Лангера-Гедиона, подтвержденный методом BACs-on-Beads.Гинекол пол. 85:66–69. 2014. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

11

Ragni MV: Пренатальная диагностика по капле цифровой ПЦР. Кровь. 130:240–241. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

12

Лачманская I и Стембальская А: Новинка молекулярные методы в пренатальной инвазивной диагностике. Гинекол пол. 84:871–876. 2013 г. (на польском языке). Вид Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

13

Baxter L и Adayapalam N: Сравнительный анализ изучение стандартной цитогенетической оценки и молекулярного кариотипирования для продуктов зачатия.Диагност Мол Патол. 22:228–235. 2013. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

14

Кииски К., Рувере Т., Зордания Р., фон Коскулл Х. и Хорелли-Куйтунен Н.: Пренатальная диагностика Дупликация 17p13.1p13.3. Кейс Rep Med. 2012:8405382012. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

15

Пиотровски К., Хенкельман М. и Заячек С.: Заменит ли новый метод молекулярного кариотипирования BAC-on-Beads традиционная цитогенетическая пренатальная диагностика? Предварительный отчеты.Гинекол пол. 83:284–290. 2012 г. (на польском языке). ПабМед/NCBI

16

Виалард Ф., Симони Г., Гомес Д.М., Абурра А., Де Тоффол С., Брю Ф., Ромеро Мартинес М.С., Нич Л., Буханна П., Маркато Л. и др.: Пренатальные BAC-on-Beads™: перспектива опыт пяти лабораторий пренатальной диагностики. Пренат Диагн. 32:329–335. 2012. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

17

Поповски Т., Виалард Ф., Лерой Б., Боулт Дж. П. и Молина-Гомес Д.: синдром Вильямса-Бёрена: пренатальный фенотип.Am J Obstet Gynecol. 205:e6–e8. 2011. Просмотр статьи : Google Scholar : PubMed/NCBI

18

Шаффер Л.Г., Коппингер Дж., Мортон С.А., Аллиман С., Берлесон Дж., Трейлор Р., Уокер С., Байерли С., Лэмб А.Н., Шульц Р. и др.: Разработка экспресс-теста для пренатального тестирование общих анеуплоидий и микроделеционных синдромов. Пренат Диагн. 31: 778–787. 2011. Посмотреть Статья : Google Scholar : PubMed/NCBI

19

Фокс К.А. и Ли В.: Пренатальная диагностика и оценка аномальной плацентации.Клин Обстет Гинекол. 60: 596–607. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

20

Сальвадор Льоренс Р., Сайнс Вьегас А., Филарди Монтойя А., Форнас Монтолиу Г. и Серрано Менор Ф.: Оценка мозжечка плода с помощью магнитно-резонансной томографии. Радиология. 59:380–390. 2017 г. (на английском и испанском языках). ПабМед/NCBI

Сверхчувствительный проточный цитометрический иммуноанализ, основанный на бесматричном удлинении ДНК, инициируемом поверхностью шариков

В белках отсутствует механизм дублирования, как в нуклеиновых кислотах, поэтому сочетание иммунологических анализов с эффективными методами амплификации нуклеиновых кислот стало эффективным способом обнаружения следов белковых биомаркеров в биологических жидкостях.Однако такие иммуноанализы обычно страдают от довольно строгого дизайна последовательности ДНК и сложных операций. Здесь мы предлагаем простой, но высокочувствительный проточный цитометрический иммуноанализ (FCI) с использованием инициированного терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой (TdT) удлинения ДНК без матрицы в качестве эффективного пути усиления сигнала (TdT-FCI) и наночастиц золота (AuNPs). ) совместно функционируют как с детектирующим антителом, так и с олигонуклеотидом 3′-ОН (ODN) в качестве преобразователя для связывания иммуноанализа и последующей амплификации ДНК, опосредованной TdT.Антиген-мишень может быть сэндвичем с захватывающим антителом, иммобилизованным на магнитных шариках (MB), и антителом для обнаружения на AuNP, чтобы принести много ODN на поверхность MB. Каждый ODN на MB может быть эффективно удлинен с помощью TdT без использования матрицы с образованием длинного поли(Т)-хвоста, который затем будет связываться со многими меченными 6-карбоксифлуоресцеином (FAM) поли(А)25. Поскольку каждый AuNP может нести несколько ODN, и каждый расширенный ODN может в конечном итоге захватывать множество FAM-poly(A)25, может быть достигнуто эффективное накопление амплифицированных флуорофоров на MB. Флуоресцентные MB могут быть индивидуально исследованы с помощью проточного цитометра, и, таким образом, может быть реализован количественный анализ целевого антигена. В сочетании с мощным проточным цитометрическим анализом простой, но эффективный механизм усиления сигнала на основе TdT снизил предел обнаружения специфического антигена простаты (PSA) до низкого уровня 0,5 пг/мл -1 . Кроме того, на основе элегантного принципа кодирования размера гранул мы усовершенствовали TdT-FCI для мультиплексного обнаружения антигена в одной реакции.Обладая уникальными достоинствами простой конструкции и эксплуатации, эффективной амплификации сигнала, мощного считывания сигнала и возможности мультиплексного анализа, этот TdT-FCI представляет собой универсальный инструмент для обнаружения биомаркеров следовых антигенов для клинической диагностики, а также прогноза.

Эта статья находится в открытом доступе

Подождите, пока мы загрузим ваш контент. .. Что-то пошло не так. Попробуйте снова?

Таблицы размеров бусин и ожерелий

бусин на дюйм

Размер шарика Бусин на дюйм Бусины на 16 дюймов Бусины на 24 дюйма
2 мм 12.5 200 300
3 мм 8,3 133 200
4 мм 6,25 100 150
5 мм 5 80 120
6 мм 4,2 66 99
7 мм 3,6 57 86
8 мм 3. 13 50 75
10 мм 2,5 40 60
12 мм 2.1 33 50

Таблица преобразования шнура

Шёлк — это традиционный шнур для бисероплетения. Его прочность и гибкость не имеют себе равных для любого другого материала такого размера. Нейлоновые и полиэстеровые шнуры заменяют шелк. Они имеют почти такую ​​же прочность и более длительный срок службы.

Число или буква определяют размер шнура. Используемый размер зависит от размера ваших бусин. Более крупные и тяжелые бусины требуют более прочного шнура.

Коды обозначают шнуры меньшего размера с меньшей емкостью (A, 1) и шнуры большей емкости с большей емкостью (FF, 8).

Шелк А Б С Д Е Ф ФФ
Нейлон 1 1,5 2 3 4 5 8

Длина ожерелья

Колье от 14 до 16 дюймов, доходит до горлышка
Принцесса 18 дюймов
Утренник От 20 до 24 дюймов, доходит до макушки бюста
Опера от 28 до 32 дюймов
Веревка Все, что больше 32 дюймов

Дополнительная информация

Для получения дополнительной информации о размерах бусин и ожерелий, номенклатуре и инструкциях по их изготовлению, обратитесь к следующим статьям:

Если вы ищете идеи для украшения из бисера, вот список драгоценных камней, которые можно использовать в качестве очень привлекательных бусин, будь то ограненные, резные или натуральные.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.